Недостатки метода ELISA
К недостаткам метода ELISA можно отнести довольно длительное время выполнения анализа. Высокой экс-прессностью обладают гомогенные методы анализа EMIT (епзуте multiplay immunoteehnic). Сущность этих методов, применяемых главным образом для анализа низкомолекулярных антигенов, состоит в следующем. Антиген ковалентно связывают с ферментом вблизи его активного центра так, чтобы фермент, с одной стороны, сохранял свою активность, а с другой – терял ее при связывании антигена с антителом. Последнее происходит в результате блокировки активного центра объемистой молекулой антитела. Модифицированный ферментом антиген смешивают с антителом. К этой смеси добавляют определяемый антиген, который вытесняет модифицированную молекулу из комплекса с антителом. В результате появляется ферментативная активность, величина которой пропорциональна концентрации определяемого вещества.
EMIT уже применяют в клинической практике для быстрого определения отравлений лекарственными и наркотическими средствами. Метод пригоден для определения многих соединений: гормонов, наркотиков, барбитуратов, антиэпилептических средств – и используется в различных областях.
Чаще всего ИФА применяют для определения мест локализации антигенов в гистохимических анализах и их концентрации в биологических жидкостях. Количественные методы ИФА начали развиваться с начала 70-х годов, и в настоящее время их используют для определения иммуноглобулинов, гормонов, вирусных и бактериальных антигенов, лекарственных препаратов, антител к различным антигенам. Методы характеризуются чрезвычайно высокой чувствительностью и абсолютной селективностью, что и делает их незаменимыми в ранней диагностике и контроле заболеваний. Важнейшие антигены, определяемых методом ИФА с указанием используемого для маркировки фермента и чувствительности.