Распространенный метод иммобилизации
Очень распространенный метод иммобилизации – включение ферментов в волокна. Сначала получают эмульсию водного раствора фермента (либо суспензию сухого фермента) в органическом растворителе, содержащем полимер, способный образовывать волокна. Чаще всего используют триацетатцеллюлозу, а также нитроцеллюлозу, этилцеллюлозу и т. п. Затем эту эмульсию продавливают через тонкие отверстия в другой растворитель, вызывающий коагуляцию полимера. Получаются волокна, содержащие микрокапельки (порядка 1 микрона) водного раствора фермента.
Не меньшее распространение, чем физические, получили химические методы иммобилизации ферментов. Суть их заключается в образовании ковалентных связей между носителем и ферментом. Мы не будем останавливаться на деталях химической предобработки носителей и методик иммобилизации.
Процессы часто могут затрагивать сразу несколько функциональных групп фермента. Очень перспективен метод сочетания ковалентной пришивки с включением в гель. В этом случае предварительно модифицируют фермент мономером, например остатком акриловой кислоты. Для этого ацилируют аминогруппы белка хлорангидридом акриловой кислоты. Затем сополимеризуют модифицированный белок, скажем, с акриламидом и билакриламидом.
Ковалентная иммобилизация – наиболее надежны» способ гетерогенизации (удержания фермента на носителе), В настоящее время налажен промышленный выпуск носителей для ковалентной иммобилизации. Однако существенно возрастает стоимость ферментного катализатора при иммобилизации таким путем.